O BD FACS Melody é um equipamento que faz purificação celular (cell sorter). Está instalado na sala de nível de segurança 3 (Biosafety Level – BSL3), possibilitando a separação de populações celulares provenientes de amostras infectadas com bactérias ou microorganismos que se enquadrem nos níveis de biossegurança 2 ou 3, e também a aquisição de amostras infectadas que não podem ser formalizadas. O equipamento alocado na sala BSL3 possibilita maior refinamento experimental a partir da purificação de populações celulares de amostras de pacientes ou a partir de modelos experimentais, pois os procedimentos de purificação por sorting geram aerossóis, que comprometem a segurança do operador do equipamento e no ambiente ao redor. Além disso, dentro da BSL3 também e possível analisar células que não podem ser formalizadas, como os experimentos de morte celular. Desta forma, para os pesquisadores que trabalham com tuberculose, SARS-CoV-2, ou outros patógenos transmitidos pelas vias aéreas que se enquadram nos níveis de biossegurança 2 ou 3, e necessitem realizar purificação celular, colocamos a disposição o BD FACS Melody Cell Sorter BSL3. Justificamos que por estar alocado na BSL3 (uso obrigatório de EPI – equipamento de proteção individual) e pelas etapas que antecedem o sorting (limpeza e esterilização do sistema) e  pós sorting (limpeza e esterilização), o custo para uso do equipamento é diferenciado.

Descrição:

O BD FACS Melody é um cell sorter desenvolvido a partir de tecnologias muito bem estabelecidas. É um instrumento equipado com célula de fluxo o que gera benefícios tanto do ponto de vista analítico, aumentando a sensibilidade do equipamento, como em termos de experiência de uso por parte dos operadores. Um equipamento com célula de fluxo elimina o estágio de maior complexidade na operação de um cell sorter: o alinhamento dos lasers responsáveis pela geração de sinais e consequente identificação das populações celulares. Ao eliminar essa etapa, uma vez que o alinhamento de lasers é fixo em equipamentos com célula de fluxo, eliminam-se também os riscos de variação de resultados entre operadores e também se reduz a complexidade operacional desse tipo de equipamento, gerando maior facilidade de uso e velocidade na rotina de preparação do equipamento para os experimentos.

Além do alinhamento fixo dos lasers de excitação por possuir uma célula de fluxo, o FACS Melody também possui um sistema de fluidos otimizado e automatizado. Ele utiliza um nozzle de 100 µm e é equipado com um inovador sistema de ajustes e monitoramento de fluidos que isentam o usuário de encontrar a configuração adequada para a realização de um experimento com alta performance. As configurações para o ajuste do stream são salvas no sistema pelo engenheiro durante a instalação/manutenção do FACS Melody. Uma vez que se inicia o stream, o equipamento executa automaticamente os ajustes necessários para assegurar a correta formação das gotas, mantendo o processo estável durante toda a realização do sorting, sem a necessidade de ajustes manuais realizados pelo usuário.

Outro ponto importante a ser mencionado é o software do FACS Melody. Chamado de FACS Chorus, o software apresenta instruções para a realização de cada procedimento no equipamento (inicialização, ativação do stream, aquisição do controle de qualidade CS&T, ajuste do Accudrop, encerramento e procedimentos corretivos). Elas são exibidas na tela do computador, com um guia descrevendo qual atividade deve ser realizada a cada momento. Esse tipo de abordagem auxilia o usuário para que as etapas sejam realizadas de acordo com as instruções, e garantem maior aprendizagem e facilidade de utilização.

 Aplicações (o que é possível fazer com o equipamento):

• Imunofenotipagem e função celular
• Separação celular (sorting)

 Procedimentos e Regras de Utilização (informar quais são as normas para utilização do equipamento): 

1. Cadastramento do usuário e do projeto pelo docente responsável, a ser realizado via preenchimento do formulário.
2. Por ser um aparelho de fácil manuseio e possuir um software intuitivo pode ser utilizado por docentes, funcionários, alunos de graduação, pós-graduação e pesquisadores da FMRP/USP ou de outras instituições de ensino e pesquisa, após treinamento que será oferecido por equipe da própria empresa BD Biosciences, ou por membros do Laboratório de Imunologia e Inflamação Pulmonar devidamente capacitados, dependendo de disponibilidade destes.  Esse treinamento deve ser comprovado por formulário disponível no site Plataforma USP Multi.
3. Por estar alocado na Sala de Biossegurança P3 (BSL3), o usuário deverá receber o treinamento para a utilização da sala e deverá ter conhecimento e obedecer as normas constantes do manual de segurança que estará disponível. Esse treinamento também deve ser comprovado por formulário.
4. Os usuários deverão adotar todas as condutas de boas práticas laboratoriais.
5. Os custos com material de consumo estão embutidos no valor pago pela utilização, incluindo o Equipamento de Proteção individual (EPI) necessário para utilização da sala de biossegurança nível 3 (BSL3).
6. O agendamento para utilização do equipamento será realizado diretamente no laboratório, ou via telefone (16-3315-3089), ou pelo e-mail flagembre@yahoo.com.br
7. Em caso de não uso do equipamento em período devidamente agendado, o usuário deverá cancelar o agendamento por telefone, com antecedência mínima de 24 horas. Caso contrário, os próximos agendamentos poderão ser restringidos pelo Comitê Gestor.
8. Os usuário receberá os dados em um pendrive e deverá fazer a cópia dos arquivos e devolver o pendrive formatado imediatamente após a aquisição do experimento. A cópia imediata dos dados, após a realização dos experimentos, será importante porque os arquivos poderão ser deletados sem aviso prévio.

Coordenação: Profª Drª Vânia Luiza Deperon Bonato

Localização: Depto de Bioquímica e Imunologia

Contato: Ana Flavia Gembre  (E-mail: flagembre@yahoo.com.br)